TIÊU\r\nCHUẨN QUỐC GIA

TCVN\r\n6600:2000

ISO 6654:1991

THỨC\r\nĂN CHĂN NUÔI - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG URE

Animal\r\nfeeding stuffs - Determination of urea content

Lời nói đầu

TCVN 6600:2000 hoàn toàn tương đương với ISO\r\n6654:1991;

TCVN 6600:2000 do Ban kỹ thuật tiêu chuẩn TCVN/TC/F17\r\nThức ăn chăn nuôi biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng đề\r\nnghị, Bộ Khoa học, Công nghệ và Môi trường (nay là Bộ Khoa học và Công nghệ)\r\nban hành;

Tiêu chuẩn này được chuyển đổi năm 2008 từ\r\nTiêu chuẩn Việt Nam cùng số hiệu thành Tiêu chuẩn Quốc gia theo quy định tại\r\nkhoản 1 Điều 69 của Luật Tiêu chuẩn và Quy chuẩn kỹ thuật và điểm a khoản 1\r\nĐiều 6 Nghị định số 127/2007/NĐ-CP ngày 1/8/2007 của Chính phủ quy định chi\r\ntiết thi hành một số điều của Luật Tiêu chuẩn và Quy chuẩn kỹ thuật.

THỨC ĂN CHĂN\r\nNUÔI - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG URE

Animal\r\nfeeding stuffs - Determination of urea content

1  Phạm vi áp dụng

Tiêu chuẩn này quy định phương pháp đo phổ để\r\nxác định hàm lượng ure trong thức ăn chăn nuôi.

2  Tiêu chuẩn trích\r\ndẫn

ISO 6498:1983, Thức ăn chăn nuôi - Chuẩn bị\r\nmẫu thử.

3  Định nghĩa

Trong tiêu chuẩn này, áp dụng định nghĩa dưới\r\nđây:

Hàm lượng ure: Phần lượng\r\nchất thu được khi xác định theo qui trình quy định trong tiêu chuẩn này.

Phần lượng này được biểu thị dưới dạng phần\r\ntrăm khối lượng.

4  Nguyên tắc

Làm mất màu dung dịch huyền phù của mẫu thử.\r\nKhuấy dung dịch và lọc. Thêm vào dịch lọc dung dịch 4-dimetyl-amino-benzaldehyd\r\n(4-DMAB) và đo độ hấp thụ bằng máy đo phổ ở bước sóng 420 nm.

5  Thuốc thử

Tất cả thuốc thử đều phải có chất lượng tinh\r\nkhiết phân tích. Nước sử dụng phải là nước cất hoặc nước có độ tinh khiết tương\r\nđương.

5.1  Than hoạt hóa: không hấp\r\nphụ ure.

5.2  Dung dịch\r\n4-dimetyl-amino-benzaldehyd (4-DMAB) được chuẩn bị như sau.

Hòa tan 1,6 g 4-DMAB trong 100 ml etanol 96 %\r\n(phần thể tích), thêm 10 ml axit clohydric đậm đặc (p₂₀ =\r\n1,19 g/ml) và khuấy đều.

Dung dịch có thể giữ tối đa 2 tuần.

5.3  Dung dịch Carrez I

Hòa tan trong nước 24 g kẽm axetat dihydrat\r\n[Zn(CH₃COO)₂.2H₂O] và 3 g axit axetic băng.\r\nThêm nước cất cho đủ 100 ml và khuấy đều.

5.4  Dung dịch Carrez II

Hòa tan trong nước 10,6 g kali hexacyanoferat\r\n(II) trihydrat (kali feroxyanua trihydrat) {K₄(Fe(CN)₆].3H₂O}.\r\nThêm nước cho đủ 100 ml và khuấy đều.

5.5  Ure, dung dịch chuẩn chứa\r\n1 g ure trong 1 I.

6  Thiết bị, dụng cụ

Sử dụng các dụng cụ thông thường trong phòng\r\nthí nghiệm và đặc biệt là các loại sau đây:

6.1  Máy lắc, có khả năng\r\nlàm việc ở tốc độ từ 30 r/min đến 40 r/min.

6.2  Phổ kế, thích hợp cho việc\r\nđo độ hấp thụ ở bước sóng 420 nm với cuvét có chiều dày là 10 mm.

6.3  Ống nghiệm, kích thước\r\n160 mm x 16 mm, có nút mài thủy tinh.

6.4  Bình định mức, dung tích\r\n100 ml và 500 ml.

6.5  Nồi cách thủy, có thể duy\r\ntrì nhiệt độ ở 20 °C.

7  Lấy mẫu

Việc lấy mẫu được đề cập đến trong một tiêu\r\nchuẩn khác.

8  Chuẩn bị mẫu thử

Chuẩn bị mẫu theo ISO 6498.

9  Cách tiến hành

9.1  Phần mẫu thử

Cân, chính xác đến 1 mg, khoảng 2 g mẫu thử\r\n(điều 8).

Đối với mẫu có hàm lượng ure lớn hơn 3 %\r\n(phần khối lượng), có thể giảm phần mẫu thử xuống 1 g hoặc pha loãng dung dịch\r\nmẫu (xem 9.2) để nồng độ không vượt quá 50 mg ure/500 ml.

Đối với mẫu có hàm lượng ure thấp, phần mẫu\r\nthử có thể tăng lên sao cho dịch lọc thu được phải trong và không có màu.

9.2  Chuẩn bị dung dịch mẫu thử

9.2.1  Chuyển phần mẫu thử\r\n(9.1) cùng 1 g than hoạt hóa (5.1) vào bình định mức 500 ml (6.4). Thêm 400 ml\r\nnước, 5 ml dung dịch Carrez I (5.3) và 5 ml dung dịch Carrez II (5.4). Lắc đều\r\nbình trên máy lắc (6.1) trong 30 min. Định mức đến vạch bằng nước, lắc đều và\r\nlọc từ từ qua giấy lọc định tính.

9.2.2  Nếu dịch lọc vẫn có\r\nmàu thì chuẩn bị lại dịch lọc như 9.2.1 nhung tăng thêm lượng than hoạt hóa.

9.3  Lên màu

Dùng pipét hút 5 ml dịch lọc trong, không màu\r\n(9.2) cho vào ống nghiệm (6.3), dùng pipet hút thêm vào đó 5 ml dung dịch\r\n4-DMAB (5.2).

Lắc đều và để đúng ống nghiệm trong nồi cách\r\nthủy 15 min ở nhiệt độ 20 °C.

9.4  Mẫu trắng

Chuẩn bị mẫu trắng song song với mẫu kiểm\r\ntra, các bước tiến hành tương tự và lượng các thuốc thử cho vào cũng tương\r\nđương như chuẩn bị mẫu thử chỉ khác là không có dịch mẫu.

9.5  Chuẩn bị đồ thị chuẩn

9.5.1  Dùng pipét lần lượt\r\nhút 1 ml, 2 ml, 4 ml, 5 ml và 10 ml dung dịch ure chuẩn (5.5) vào 5 bình định\r\nmức 100 ml (6.4). Định mức đến vạch bằng nước cất. Như vậy 1 ml dung dịch chuẩn\r\nnày chứa lần lượt 10 μg, 20 μg, 40 μg, 50 μg và 100 μg ure.

9.5.2  Từ các dung dịch\r\nchuẩn này (9.5.1) dùng pipét hút chính xác lần lượt mỗi bình 5 ml cho vào 5 ống\r\nnghiệm (6.3). Thêm vào mỗi ống nghiệm 5 ml thuốc thử 4-DMAB (5.2) và lắc đều.\r\nĐo độ hấp thụ của các dung dịch ở bước sóng 420 nm trên máy đo phổ kế (6.2). Hiệu\r\nchỉnh với dung dịch chuẩn 5 ml thuốc thử 4-DMAB và 5 ml nước.

9.5.3  Dựng đồ thị chuẩn\r\nvới trục tung là các giá trị độ hấp thụ và trục hoành là nồng độ ure tính theo\r\nμg/ml.

9.6  Đo phổ

Chuyển dung dịch mẫu thử đã chuẩn bị theo 9.3\r\nvào cuvét và đo độ hấp thụ trên máy phổ kế ở bước sóng 420 nm, hiệu chỉnh với\r\nmẫu trắng (9.4).

CHÚ THÍCH Nếu mẫu chứa các hợp chất nitơ như\r\ncác axit amin, thì tiến hành đo độ hấp thụ ở bước sóng 435 nm.

9.7  Số phép xác định

Tiến hành xác định hai phép xác định các phần\r\nmẫu thử trên cùng một mẫu thử.

10  Biểu thị kết quả

Hàm lượng ure có trong mẫu thử, tính theo\r\nphần trăm khối lượng, được biểu thị bằng công thức sau:

trong đó

c là lượng ure có\r\ntrong dịch lọc của mẫu thử được xác định từ đường chuẩn (9.5.3), tính bằng\r\nμg/ml.

m là khối lượng mẫu\r\nthử (9.1), tính bằng g.

11  Báo cáo kết quả

Trong báo cáo kết quả phải ghi rõ phương pháp\r\nđã sử dụng và kết quả thu được. Báo cáo cũng phải đề cập đến những chi tiết\r\nthao tác không được nêu ra trong tiêu chuẩn này hoặc được phép lựa chọn, cùng\r\nvới các chi tiết của bất kỳ yếu tố nào có ảnh hưởng tới kết quả.

Báo cáo phải bao gồm tất cả các thông tin cần\r\nthiết để nhận biết được toàn diện mẫu thử.