TIÊU CHUẨN NHÀ NƯỚC

TCVN 3297 - 80

THUỐC SINH VẬT THÚ Y
\r\nVACXIN DỊCH TẢ LỢN NHƯỢC ĐỘC DẠNG ĐÔNG KHÔ
\r\nVeterinary biological preparations
\r\nSwine fever eo pinised Live virus vaccine (Lyophilored)

Tiêu chuẩn này áp dụng cho vacxin dịch tả lợn nhược\r\nđộc dạng đông khô phòng bệnh dịch tả lợn, viết tắt là (Vacxin DTLNĐ đông khô).

Vacxin đông khô chế tự vacxin dạng tươi đã đặt tiêu\r\nchuẩn với chất bổ trợ đông khô.

Vacxin dùng tiêm cho những lợn khỏe mạnh, nhằm\r\nphòng bệnh dịch tả lợn.

1. QUY ĐỊNH CHUNG

1.1. Vacxin DTLNĐ dạng đông khô phải được chế tạo\r\ntheo quy trình kỹ thuật hiện hành.

1.2. Vacxin DTLNĐ dạng đông khô trước khi dùng tiêm\r\ncho lợn phải được kiểm nghiệm và đạt tiêu chuẩn quy định. Việc kiểm nghiệm do\r\ncơ quan có thẩm quyền thực hiện.

2. YÊU CẦU KỸ THUẬT

Vacxin phải đạt các chỉ tiêu quy định trong bảng\r\ndưới đây:

3. PHƯƠNG PHÁP KIỂM TRA

3.1. Kiểm tra cảm quan:

3.1.1. Kiểm tra màu: Màu của vacxin phải đồng nhất.\r\nNếu chế phẩm có lõi đen bên trong, có màu đỏ dính ở đáy ampun hoặc lọ, hay có\r\nvật lạ lẫn trong chế phẩm thì vacxin không đạt yêu cầu.

3.1.2. Kiểm tra độ hòa tan: Cho 4 phần nước sinh lý\r\năn vào 1 đến 4 phần chế phẩm để từ 1 đến 3 phút, lắc nhẹ, yêu cầu phải tan hết,\r\ncho màu đỏ thẫm (chất bổ trợ là máu) và hồng nhạt (chất bổ trợ là sữa hoặc dung\r\ndịch đường).

3.2. Kiểm tra độ chân không: Theo quy trình hiện\r\nhành.

3.3. Kiểm tra hàm lượng nước: Theo quy trình hiện\r\nhành.

3.4. Kiểm tra chất thuần khiết

3.4.1. Tạp trùng là vi trùng: lấy vacxin pha với\r\nnước sinh lý mặn vô trùng, cấy trên các môi trường kiểm nghiệm: Thạch máy, nước\r\nthịt yếm khí, thạch nấm. Đưa môi trường vào từ âm 37⁰C, bồi dưỡng\r\nthạch nấm ở nhiệt độ phòng. Hàng ngày phải theo dõi môi trường cho đến ngày thứ\r\n7. Tất cả các loại môi trường đều vô trùng là đạt yêu cầu. Nếu có tạp trùng thì\r\nphải xem tạp trùng là loại gì lấy canh trùng ấy tiêm dưới da cho 3 chuột bạch\r\nvới liều cho mỗi con 0,3 ml, tiêm cho 3 con chuột bạch với liều cho mỗi\r\ncon 0,3 ml, tiêm cho 3 con chuột lang với liều cho mỗi con 0,5 ml và\r\ntiêm cho 3 thỏ với liều cho mỗi con 1 ml, theo dõi 10 ngày. Tất cả\r\nchuột, thỏ này đều phải khỏe mạnh bình thường thì cũng được coi là đạt yêu cầu.

Nếu chúng chết, phải mổ khám kiểm tra kỹ về mặt vi\r\nsinh vật và làm lại. Nếu làm lại mà chuột, thỏ khỏe mạnh bình thường thì vacxin\r\ncũng được coi là đạt tiêu chuẩn. Nếu chúng lại chết thì phải kết hợp với kiểm\r\ntra an toàn như ở điều 3.5. để kết luận chính xác.

3.4.2. Tạp trùng là siêu vi trùng thì phải kết hợp\r\nvới kiểm tra an toàn vacxin ở điều 3.5.1 và 3.5.2 và xét kỹ quá trình sản xuất\r\nvacxin tươi. Nếu không có hiện tượng gì nghi thì vacxin đạt yêu cầu. Nếu có\r\nhiệu tượng nghi thì ghi lại, và theo dõi tiếp, kết luận cho chính xác nếu có\r\nlẫn siêu vi trùng khác thì vacxin không đạt tiêu chuẩn.

3.5. Kiểm tra an toàn

3.5.1. Lấy vacxin pha loãng ở nồng độ 10^-1,\r\ntiêm dưới da cho 3 chuột bạch, 3 chuột lang, 3 thỏ và theo dõi như điều 3.4.1,\r\ntất cả chuột, thỏ đều phải khỏe mạnh bình thường. Nếu chúng chết thì dùng lợn\r\nđể kiểm tra theo điều 3.5.2.

3.5.2. Dùng 3 lợn chưa miễn dịch, thể trọng 25 đến\r\n30 kg, béo, khỏe mạnh, chăm sóc chu đáo trước và sau khi thí nghiệm,\r\ntiêm dưới da cho mỗi con 2ml nồng độ 10^-1. Theo dõi 12 ngày\r\ncả 3 lợn đều khỏe mạnh bình thường thì vacxin đạt yêu cầu. Nếu lợn ốm chết thì\r\nvacxin không đạt yêu cầu.

3.6. Kiểm tra hiệu lực

3.6.1. Xác định liều động lực tối thiểu đối với\r\nthỏ. Căn cứ vào lượng vacxin tươi có trong chế phẩm, pha với muối sinh lý mặn\r\nthành nồng độ 10^-4, tiêm cho 3 thỏ vào tĩnh mạch tai, mỗi con 1 ml.\r\nThỏ dùng thử phải có thể trọng từ 1,6 đến 2kg, tuổi từ 4 đến 5\r\ntháng, phải khỏe mạnh, không bệnh tật, không ỉa chảy … Thân thiện trung bình 38⁰\r\nđến 39,5⁰C. Chăm sóc thỏ chu đáo, theo dõi chặt chẽ hiện tượng lâm\r\nsàng như: thân nhiệt … trước và sau khi tiêm thử, cách ly theo dõi 2 đến 3 ngày\r\nthấy thỏ bình thường thì tiêm.

Tiêm xong theo dõi thân nhiệt thỏ trong vòng 96\r\ngiờ, 24 giờ sau khi tiêm theo dõi thân nhiệt như thường lệ: ngày 2 lần đo nhiệt\r\nđộ thỏ, sáng từ 7 giờ đến 8 giờ; chiều từ 16 giờ đến 17 giờ. Từ 24 giờ trở đi,\r\ncứ 6 tiếng đo nhiệt độ thỏ một lần cho tới khi nào thân nhiệt lên cao và xuống\r\nbình thường thì đánh giá phản ứng nhiệt của thỏ và mổ thỏ xem có bệnh tích gì\r\nnghi ngờ không.

Đánh giá: Nếu 1 trong 3 thỏ có phản ứng nhiệt điển\r\nhình, hoặc 2 trong 3 thỏ có phản ứng nhẹ, mổ khám thỏ không có bệnh tích gì\r\nnghi ngờ thì vacxin đạt yêu cầu về phản ứng nhiệt của thỏ đối với giống siêu vi\r\ntrùng DTLNĐ.

- Phản ứng nhiệt điển hình:

Thời gian nung bệnh từ 24 giờ đến 42 giờ thân nhiệt\r\nlên cao so với bình thường từ 1,2⁰ đến 2⁰C.

Thời gian giữ nhiệt cao từ 12 đến 24 giờ đồ thị\r\nnhiệt độ lên cao dần và xuống thấp dần thành hình cung.

- Phản ứng nhiệt nhẹ:

Thời gian nung bệnh kéo dài tới 72 giờ thân nhiệt\r\nlên cao so với bình thường từ 0,5 đến 0,8⁰C. Thời gian giữ nhiệt từ\r\n12 đến 18 giờ.

3.6.2. Xác định liều bảo vệ tối thiểu đối với lợn.\r\nDùng 6 lợn choai khối lượng từ 25 đến 30 kg khoảng 4 đến 5 tháng tuổi\r\nkhỏe mạnh, béo tốt chưa tiêm phòng tả dịch tả lợn, theo dõi và chăm sóc chu đáo\r\ntrước và sau khi thử nghiệm.

Tiêm 3 con với mỗi liều cho mỗi con 1 ml dưới\r\nda gốc tai, vacxin pha 10^-4, còn 3 con kia làm đối chứng. Sau khi\r\ntiêm 12 ngày thì công cường độc với liều 1 ml máu nguyên siêu trùng\r\ncường độc dịch tả lợn cho mỗi con. Cộng cả 6 con theo dõi tiếp 24 ngày nữa. Cả\r\n3 lợn tiêm thì phải khỏe mạnh bình thường, 3 đối chứng phải phát bệnh điển\r\nhình. Từ ngày thứ 3 sau khi công cường độc phải chết ít nhất là 2/3, mổ khám,\r\nphải có bệnh tích điển hình và bệnh dịch tả lợn. Như vậy là vacxin đạt yêu cầu.

Nếu lợn thử cũng phát bệnh dịch tả, hoặc đối chiếu\r\nchỉ chết 1/3 thì phải làm lại. Nếu làm lại mà cũng không đạt yêu cầu thì hủy bỏ\r\nlô vacxin ấy.

4. BAO GÓI, GHI NHÃN, VẬN\r\nCHUYỂN VÀ BẢO QUẢN

4.1. Bao gói: Vacxin đông khô dựng trong ampun,\r\ntrong lọ nút kín, không nứt, không hở. Mỗi ampun hoặc lọ phải xếp vào hộp có\r\nngăn hoặc xếp gọn vào trong túi nilông. Đóng vào hòm khối lượng từ 25 đến 30 kg.

4.2. Ghi nhãn: Mỗi ampun hoặc lọ, mỗi hộp hoặc túi\r\nnilông đều phải có nhãn hiệu ghi đầy đủ rõ ràng:

- Vacxin DTLNĐ đông khô

- Số lô

- Số kiểm nghiệm

- Số hiệu

- Nơi sản xuất

- Ngày sản xuất

- Hạn dùng

- Cách dùng

- Số lượng ampun hoặc lọ

4.3. Quá trình vận chuyển phải bảo quản vacxin\r\ntrong lạnh phải che nắng che mưa, sao cho vacxin về đến cơ sở dùng phải đảm\r\nbảo, không vỡ, không nứt, còn nguyên vẹn nhãn hiệu.

4.4. Bảo quản

4.4.1. Thời hạn bảo quản kể từ ngày thu hoạch\r\nvacxin. Để ở nhiệt độ - 15⁰C trở xuống vacxin giữ được 12 tháng

- 5⁰C đến - 15⁰C vacxin giữ\r\nđược 9 tháng

- 0⁰C đến - 5⁰C vacxin giữ\r\nđược 6 tháng.

0⁰C đến + 4⁰C vacxin giữ được\r\n3 tháng

+ 10⁰C đến + 15⁰C vacxin giữ\r\nđược 10 ngày.

Nếu thời hạn bảo quản vacxin còn thì kiểm tra lại\r\nhiệu lực. Nếu còn hiệu lực thì được phép gia hạn từ 1 tháng đến 3 tháng nữa.

4.4.2. Vacxin đông khô đã pha để tiêm cho lợn phải\r\nbảo quản trong phích có nước đá, không được để ánh sáng nắng chiếu vào và phải\r\ntiêm ngay, không để quá 5 giờ sau khi pha. Khi pha có thể cho kháng sinh\r\npênicilin và stretomicin 200 đơn vị mỗi loại trong 1 ml huyên định.