TIÊU CHUẨN\r\nNGÀNH

10TCN\r\n708:2006

TIÊU\r\nCHUẨN RAU- LẠC PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG THUỐC TRỪ SÂU CHLORFLUAZURON

1.\r\nPhạm vi áp dụng

Tiêu chuẩn này quy\r\nđịnh phương pháp xác định dư lượng thuốc sâu Chlorfluazuron trong rau (bắp\r\ncải), lạc.

2.\r\nTài liệu viện dẫn

TCVN 2217 - 77. Nước\r\ncất.

10 TCN 386-99. Phương pháp lấy mẫu kiểm định chất lượng và dư lượng\r\nthuốc bảo vệ thực vật.

3.\r\nQuy định chung

3.1. Lấy mẫu

Theo 10TCN\r\n386-99.

3.2. Hóa chất\r\nvà thuốc thử

Hóa chất,\r\nthuốc thử dùng trong các phép phân tích phải là loại tinh khiết phân tích.        

3.3. Nước\r\ncất 

Theo TCVN\r\n2217 – 77

3.4. Tất cả các\r\nphép thử phải tiến hành song song với ít nhất hai lượng cân mẫu thử.

Kết quả phép\r\nthử là trung bình của các lần xác định nếu sai khác kết quả giữa các lần thử\r\nkhông vượt quá 20%.

4.\r\nXác định dư lượng Chlorfluazuron

4.1. Nguyên\r\ntắc

4.1.1. Rau:

Dư lượng\r\nChlorfluazuron trong rau được chiết ra khỏi mẫu bằng acetone và được làm sạch\r\nbằng silicagel 1.5% H₂O. Hoạt chất được rửa giải bằng hỗn hợp rửa\r\ngiải Acetone: Toluen (2: 8) và được xác định bằng sắc ký khí với detector ECD.

4.1.2. Lạc

Dư lượng\r\nChlorfluazuron trong lạc được chiết ra khỏi mẫu bằng acetonitril, được loại dầu\r\nbằng n-hexan, sau đó được làm sạch bằng silicagel 1.5% H₂O. Hoạt\r\nchất được rửa giải bằng hỗn hợp rửa giải Acetone: Toluen (2: 8) và được xác\r\nđịnh bằng sắc ký khí với detector ECD.

4.2. Dụng cụ,\r\nthiết bị và hoá chất

4.2.1. Dụng\r\ncụ, thiết bị

Ống đong 10,\r\n100ml.

Phễu thủy\r\ntinh.

Giấy lọc băng\r\nxanh.

Bông thủy\r\ntinh.

Bình định mức\r\n10, 100ml.

Bình tam giác\r\n50, 250ml.

Cốc thủy tinh\r\n50, 150, 250ml.

Pipette 0,1;\r\n1;10ml.

Cột thủy tinh\r\nlàm sạch (1 x 25cm).

Bơm chân\r\nkhông.

Bộ lọc\r\nBuchner.

Hệ thống\r\nchưng cất quay.

Cân phân tích\r\n(độ chính xác 0,00001; 0,1g).

Máy nghiền\r\nmẫu

Máy sắc ký\r\nkhí với detector ECD

Cột sắc ký\r\nkhí: cột mao quản HP-5MS (3,0m; 250mm; 0,25mm)\r\nhoặc tương đương.

Syringe 10ml

4.2.2. Hóa chất

Acetone

Acetronitril

n-Hexane

2-Propanol

Toluene

Hỗn hợp rửa giải\r\nAcetone: Toluen (2:8)

Chất chuẩn\r\nChlorfluazuron đã biết trước hàm lượng.

Silicagel 1,5% nước:\r\nhoạt hoá silicagel ở 130⁰C trong 8 giờ, để nguội trong bình hút ẩm.\r\nGiảm hoạt hoá bằng nước cất theo tỉ lệ silicagel: nước cất bằng 98,5: 1,5. Lắc\r\nđều, để yên 24 giờ trước khi sử dụng.

Cát

Sodium sulfate khan:\r\nhoạt hoá ở 130 ⁰C trong 8 giờ, để nguội trong bình hút ẩm. Cho vào\r\nhộp đậy kín

4.3. Chuẩn bị dung\r\ndịch chuẩn

- Dung dịch gốc: Cân\r\nkhoảng 10 mg chất chuẩn Chlorfluazuron chính xác tới 0,01mg vào bình định mức\r\n10ml, định mức bằng Acetone, được dung dịch gốc.

- Dung dịch chuẩn:\r\nBằng phương pháp pha loãng liên tục từ dung dịch có nồng độ thu được, được dãy\r\nchuẩn có nồng độ 10; 5; 2; 1; 0,5mg/ml

4.4. Chuẩn bị dung\r\ndịch mẫu thử

4.4.1. Chiết xuất mẫu

4.4.1.1. Rau

Cân chính xác 20g mẫu\r\n(Mm) (được cắt nhuyễn và trộn đồng nhất vào máy nghiền mẫu). Cho vào 100ml\r\nacetone. Nghiền 2 phút với tốc độ cao. Lọc qua bộ lọc Buchner, tráng cốc nghiền\r\nvà bã lọc bằng 50ml acetone. Chuyển dịch lọc vào bình định mức 200ml (V), định\r\nmức chính xác dịch lọc đến 200ml bằng acetone. Lấy 20ml (V1) dịch chiết vào\r\nbình cầu 50ml, thêm vào 10ml 2-Propanol. Cô cạn ở 40⁰C bằng hệ thống\r\nchưng cất quay chân không.

4.4.1.2. Lạc

Cân chính xác 20g mẫu\r\nvào máy nghiền mẫu thêm 100ml acetonitril. Nghiền 2 phút với tốc độ cao. Lọc\r\nqua bộ lọc Buchner, tráng cốc nghiền và bã lọc bằng 50ml acetonitril. Chuyển\r\ndịch lọc vào bình định mức 200ml, định mức chính xác dịch lọc đến 200ml (V)\r\nbằng acetonitril. Lấy 20ml (V1) dịch chiết vào phểu chiết 50ml. Chiết 2 lần,\r\nmỗi lần 20ml n-hexan, lắc mạnh, để yên trong 5 phút. Loại bỏ lớp n-hexan. Cho\r\nlớp acetronitril vào bình cầu 50ml. Cô cạn ở 40⁰C bằng hệ thống\r\nchưng cất quay chân không.

4.4.2. Làm sạch mẫu

Chuẩn bị cột làm\r\nsạch: lần lượt nhồi vào cột:

- Bông thủy tinh

- Cát (0,5g)

- Sodium sulfate khan\r\n(0,5g)

- Silicagel 1,5% nước\r\n(1g)

- Sodium sulfate khan\r\n(0,5g)

- Cát (0,5g)

Rửa cột bằng 50ml\r\nn-Hexane, dịch chiết sau cô cạn được hòa tan với 2ml Toluen và chuyển vào cột,\r\nrửa bẩn với 9ml Toluen, sau đó rửa giải bằng 10ml hỗn hợp rửa giải. Dịch rửa\r\nđược cho vào cầu 50ml. Sau đó cô cạn ở 40^oC. Định mức bằng 1ml\r\nAceton. Xác định bằng máy sắc ký khí với detector ECD.

4.5. Điều kiện phân\r\ntích

Cột sắc ký khí: cột\r\nmao quản HP- 5MS (30,0m; 250mm;\r\n0,25mm) hoặc tương đương

Nhiệt độ buồng bơm\r\nmẫu: 250^oC

Nhiệt độ cột tách:\r\nChương trình nhiệt độ

Nhiệt độ dectector: 280^oC

4.6. Tiến hành phân tích trên máy

4.6.1. Xây dựng đường chuẩn

Bơm dung dịch chuẩn cho đến khi số đo diện\r\ntích của pic chuẩn thay đổi không lớn hơn 1% giá trị ban đầu.

Xây dựng đường chuẩn (tương quan giữa nồng độ\r\nvà diện tích pic của chất chuẩn) của Chlorfluazuron tại 5 điểm tương ứng với 5\r\nnồng độ 10; 5; 2 ; 1; 0,5mg/ml.

4.6.2. Bơm mẫu

Bơm lần lượt dung dịch mẫu lập lại 3 lần.

Dùng đường chuẩn để tính nồng độ mẫu thử khi\r\nbơm vào máy (Nm).

5. Tính toán kết quả

Dư lượng Chlorfluazuron trong mẫu (X) được\r\ntính theo công thức sau:

Trong đó:

P: Độ tinh khiết của\r\nchuẩn

Mm: Khối lượng mẫu\r\n(g)

Ve: Thể tích cuối của\r\nmẫu (ml)

V1: Thể tích pha hữu\r\ncơ được lấy để làm sạch (ml)

V: Thể tích cuả pha\r\nhữu cơ ban đầu ( ml)

Nm : Nồng độ mẫu thử\r\nkhi bơm vào máy (mg/ml).

6. Hiệu suất\r\nthu hồi và giới hạn xác định của phương pháp

Hiệu suất thu hồi\r\ntrong rau:                             80-90%

Hiệu suất thu hồi\r\ntrong quả:                            80-90%

Giới hạn xác định của\r\nphương pháp (LOQ):0,005 mg/kg

PHỤ LỤC

GIỚI\r\nTHIỆU HOẠT CHẤT CHLORFLUAZURON

Tên thông thường của hoạt chất : Chlorfluazuron

Tên hóa học: 1- [3,5- dichloro - 4 -\r\n(3-chloro -5- trifluoromethyl - 2 - pyridyloxy) phenyl] -3 -\r\n(2,6-difluorobenzoyl)ure.

Công thức cấu tạo:

Công thức phân tử: C₂₀H₉Cl₃F₅N₃O_3\r\n

Khối lượng phân tử: 540.7

Độ hòa tan (ở 20 ^oC) trong:

 Nước: <0,01mg/L

 Hexane: <0,01g/L

 n-octanol: 1g/L

 Xylene: 2,5 g/L

 Methanol: 2,5 g/L

 Toluene: 6,6\r\ng/L

 Isopropanol:\r\n7 g/L

 Dicloromethane: 22\r\ng/L

 Acetone: 55 g/L

 Cyclohexanone: 110\r\ng/L

Độ bền:

Bền với ánh sáng và nhiệt.

Áp suất hóa hơi: <10 ^-5 mPa ở\r\n20 ^oC.

Tính chất vật lý: dạng tinh thể màu trắng.